إليسا: كيف يتم التحليل؟ السعر. فك النتائج. تفاصيل حول اختبار الدم ELISA ، ماهيته وطريقة فك تشفير ELISA

عدوى فيروس نقص المناعة البشرية هي تشخيص خطير. يمكن أن تؤدي الأخطاء في التشخيص إلى عواقب وخيمة. تحليل ELISA لفيروس نقص المناعة البشرية هو أكثر طرق البحث سهولة ، ولكنه ليس بالمعلومات في جميع الحالات.

ELISA - مقايسة مناعية إنزيم. تتمثل مهمة طريقة ELISA في اكتشاف الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة في المواد البيولوجية. باستخدام الطريقة ، من الممكن تتبع التواجد في السائل ليس للفيروسات نفسها ، ولكن فقط للأجسام المضادة المنتجة استجابة لوجودها. يستخدم ELISA على نطاق واسع في تشخيص الأمراض المنقولة بالاتصال الجنسي. يساعد في تحديد الأمراض المنقولة جنسياً.

هناك عدة أنواع من ELISA: البديل المباشر ، البديل غير المباشر ، طريقة الساندويتش. في أي حال ، تعتمد التقنية على تحديد وجود الأجسام المضادة ، والتي تعمل كمؤشر لاختراق عامل أجنبي. للكشف عن هذه "العلامات" ، يتم معالجة المكون البيولوجي بالأنزيمات.

ELISA يكتشف الأجسام المضادة بدقة 96-98٪ ، الخطأ لا يكاد يذكر. 2-4٪.

ELISA - طريقة لتشخيص فيروس نقص المناعة البشرية

تحليل ELISA لفيروس نقص المناعة البشرية هو المرحلة الأولى من التشخيص. مستضدات فيروس نقص المناعة هي البروتينات p24 و p15 و p17 و p31 والبروتينات السكرية gp 41 و gp55 و gp66 و gp120 و gp160.

للكشف عن البروتين الفيروسي ، يتم أخذ جزء من الدم من الوريد. يتم معالجة العينة المرسلة لفحص الدم ELISA بكواشف المقايسة المناعية الإنزيمية. المصل معزول عن الدم. إذا تم العثور عليهم أثناء الدراسة ، فهذا يعني أن الفيروس موجود بالفعل في الدم.

يعطى الدم بدقة على معدة فارغة. قبل يومين من التحليل ، لا ينصح بتناول الأطعمة الدسمة وشرب الكحول. يجب التوقف عن تناول الأدوية المضادة للفيروسات في غضون 14 يومًا.

مزايا الطريقة:

• تكلفة منخفضة نسبيًا
• ثبات عالي في الكواشف.
• حساسية عالية
• مهلة قصيرة؛
• الحد الأدنى من تأثير العامل البشري.

يتم إنتاج أنظمة اختبار ELISA الحديثة وفقًا للمعايير العالمية. هذا يحسن دقة الطريقة.

ELISA لا تعطي دائمًا نتائج موثوقة. بعد دخول الفيروس إلى الدم ، تبدأ المرحلة الكامنة (الخفية) من التطور. الفترة التي تبدأ فيها الفيروسات في التكاثر ولم تتشكل الأجسام المضادة بعد تسمى "فترة النافذة المصليّة". لا جدوى من عمل ELISA في هذه المرحلة. إذا حدثت عدوى ، ستكون النتيجة. تعتمد سرعة اكتشاف الفيروس لنفسه على عدد الخلايا الخطرة التي دخلت الجسم. مع الجماع غير المحمي أو نقل الدم المصاب ، ستكون هذه الفترة ضئيلة.

من أجل الموثوقية العالية لـ ELISA لفيروس نقص المناعة البشرية ، أجريت الدراسة ثلاث مرات. المواعيد النهائية لـ ELISA لفيروس نقص المناعة البشرية:

• بعد 6 أسابيع من الاتصال المحتمل ،
• في 3 أشهر ،
• بعد ستة شهور.

الجيل الرابع من ELISA لفيروس نقص المناعة البشرية هو الطريقة الأكثر إفادة في المراحل المبكرة من الإصابة. يمكن إجراؤها في وقت مبكر بعد شهر واحد من الإصابة المزعومة. الاختبار مكلف مقارنة بنظيره من الجيل الثالث. لذلك ، في المؤسسات الطبية العامة ، يتم استخدامه كـ طريقة إضافيةالتشخيص. يتم إجراء الاختبار 3 مجانًا ، فإذا كان من المستحيل إعطاء إجابة لا لبس فيها بناءً على نتائجه ، يتم إرسال المريض للجيل الرابع من ELISA.

الأهمية!مباشرة بعد الإصابة ، يصبح الشخص معديا. إنه خطر على الآخرين ، حتى لو لم يعرف بعد عن تشخيصه!

إذا تم الكشف عن الأجسام المضادة لمستضدات فيروس نقص المناعة البشرية أثناء ELISA ، فمن الضروري إجراء دراسات إضافية. انها تنتمي الى هؤلاء. موثوقية هذه الطريقة 80٪. يقوم تحليل تفاعل البوليميراز المتسلسل بتحليل الدم والسائل المنوي و إفرازات مهبلية. سائل بيولوجيينقسم في مفاعل طبي ، ثم يخضع للعلاج بالأنزيم. نتيجة لذلك ، يتم الحصول على بيانات حول تركيز خلايا فيروس نقص المناعة البشرية في وسط سائل. بسبب الخطأ الكبير (20٪) ، بنتيجة إيجابية ، يتم إجراء النشاف المناعي بالإضافة إلى ذلك.

الخطوة التشخيصية التالية هي اختبار كومبو (أو النشاف المناعي). هذه دراسة حساسة للغاية (ثقة 98٪) ويجب إجراؤها إذا كانت نتائج ELISA غير حاسمة في 6 أشهر.

تفسير نتائج ELISA

وقت فك التشفير من 24 إلى 48 ساعة. إذا كان من الضروري الحصول على المعلومات بشكل عاجل (التدخل الجراحي مطلوب) ، يتم فك التشفير في غضون ساعتين. لا تحتوي المحطات الطبية الإقليمية دائمًا على الكواشف اللازمة. تؤخذ العينة في مكان الإعارة ثم تنقل إلى المركز الإقليمي. في ظل هذه الظروف ، يمكن معرفة النتيجة في غضون أسبوع إلى أسبوعين.

يمكن أن تكون نتيجة المقايسة المناعية للإنزيم موجبة أو سلبية ؛ ليس هناك من خيارات اخرى.

حتى لو كانت النتيجة إيجابية أثناء اختبار ELISA الأساسي والمتكرر ، فلا يمكن التعرف على المريض على أنه مصاب بفيروس نقص المناعة البشرية. خطأ محتمل. أسباب النتيجة الإيجابية الخاطئة:

• الأمراض المزمنة؛
• أمراض معدية طويلة الأمد
• حمل.

لذلك ، يجب توضيح نتيجة التحليل بدراسات إضافية.

إذا كان الشخص مصابًا بفيروس نقص المناعة البشرية أثناء التنظير المناعي لفيروس نقص المناعة البشرية (رد الفعل) ، مما يعني أنه يتمتع بصحة جيدة.

تتكيف خلايا الفيروس في النهاية مع الأدوية الموصوفة. للتحكم ، يتم تكرار اختبار ELISA بشكل دوري.

في بعض الأحيان يظهر التجلط المناعي نتيجة سلبية خاطئة. فيروس نقص المناعة نادر للغاية 6 أشهر (أو أكثر). هذا ممكن إذا دخلت كمية صغيرة من الخلايا الفيروسية إلى مجرى الدم. في 0.5٪ من العدد الإجمالي للحالات ، لا يمكن تشخيص العدوى إلا بعد عام. في 99.5 ٪ ، في غضون ستة أشهر بعد الإصابة ، ستعطي ELISA نتيجة موثوقة.

حتى مع الدراسات عالية الدقة ، لا يزال هناك هامش خطأ قدره 2٪. يجب ألا ننسى العامل البشري. للتخلص من احتمال الخطأ ، يمكن إجراء الاختبار في مؤسستين مختلفتين.

لقد توسعت قائمة طرق التشخيص المتاحة بشكل سريع في العقود الأخيرة ، يحاول خبراء التشخيص الجمع بين مزايا جميع التحليلات السابقة في طرق جديدة ، والتخلص من جميع أوجه القصور السابقة.

في الآونة الأخيرة ، في كثير من الأحيان في قائمة الإجراءات التشخيصية ، تظهر المقايسة المناعية للإنزيم - اختبار حديث وجديد إلى حد ما ، لا يعرفه سوى القليل عن الشخص العادي الذي لا علاقة له بالطب. ومع ذلك ، فإن هذه التقنية تعمل على تجديد صفوف أتباعها بسرعة بين الطاقم الطبي المؤهل. ما هو وفي أي الحالات يجب استخدامه ، يمكنك محاولة اكتشافه من خلال التعرف على ميزاته وخصائصه الرئيسية.

المقايسة المناعية للإنزيم هي تقنية معملية مفيدة تعتمد على التفاعل الجزيئي للمستضد والجسم المضاد ، مما يجعل من الممكن اكتشاف بروتينات معينة في المواد البيولوجية (عينات للبحث). يمكن أن تكون هذه البروتينات عبارة عن إنزيمات وكائنات دقيقة مختلفة (فيروسات ، بكتيريا ، فطريات) ، بروتوزوا ، إلخ.

بعد اكتشاف الطريقة ، تم إعطاؤها اسم اختبار ELISA ، والذي لا يرتبط باسم المكتشفين ، ولكنه اختصار للاسم الكامل في النسخة الإنجليزية - مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم. يستخدم الأطباء في جميع أنحاء العالم هذا الاسم ، ويسمي بعض الأطباء في البلدان الناطقة بالروسية هذا النوع من الدراسة أيضًا.

المبدأ الرئيسي لهذه الطريقة هو التفاعل الجزيئي "مستضد - جسم مضاد".

المستضد هو أي جزيء غريب يدخل جسم الإنسان كجزء من ميكروب ممرض. عادة ما تكون المستضدات عبارة عن جزيئات بروتينية. بالإضافة إلى الكائنات الحية الدقيقة ، يمكن أن يكون هذا "الغريب" عبارة عن خلايا من دم شخص آخر لا تتطابق في المجموعة أو عامل Rh.

استجابة لدخول مثل هذا المستضد في الجسم ، يتم إطلاق تفاعل مناعي يهدف إلى الحماية من أي جزيئات غريبة. يحدث هذا بسبب تخليق عوامل خاصة لجهاز المناعة - الأجسام المضادة (الغلوبولين المناعي). كل جسم مضاد مناسب فقط لمستضد معين ، ويعمل على تحييد العامل الممرض "الغريب" من خلال الارتباط به في مركب واحد. وتسمى عملية الارتباط هذه تفاعل الجسم المضاد ـ المستضد.

أنواع الأجسام المضادة

تنقسم جميع الأجسام المضادة (الغلوبولين المناعي) إلى 5 أنواع اعتمادًا على مرحلة الاستجابة المناعية التي تظهر فيها:

بالنسبة لتشخيص ELISA ، غالبًا ما تكون مستويات الغلوبولين المناعي IgG و IgM و IgA مهمة. من خلال اعتماداتهم ، يمكنك معرفة ما إذا كان الشخص قد أصيب بمرض من قبل أو أصيب مؤخرًا ، سواء كان قد طور مناعة أو أن جسمه أعزل ضد الأمراض.

مزايا وعيوب المقايسة المناعية الإنزيمية

في الوقت الحالي ، تعد ELISA واحدة من أكثر الطرق دقة وحساسية. تم اعتماده من قبل المتخصصين في مختلف مجالات الطب ويستمر في توسيع نطاقه.

مزايا الطريقة

• دقة عالية للبيانات المستلمة.
• الحساسية (تسمح لك باكتشاف المادة المطلوبة حتى مع وجود الحد الأدنى من العوامل الممرضة في العينة).
• إمكانية التشخيص في الأيام الأولى للمرض أو في فترة الحضانة.
• سرعة الحصول على البيانات مقارنة بالطرق الأخرى ذات الدقة المماثلة.
• أتمتة عالية للعملية ومشاركة بشرية دنيا ، مما يقلل من خطأ المؤدي.
• الحصول على بيانات عن مرحلة العملية المرضية وفعالية العلاج المختار.
• غير مؤلم ومنخفضة الغازية في اختيار المواد.

عيوب الطريقة

• في معظم الحالات ، يسمح لك بتحديد استجابة الجسم للعامل الممرض ، وليس العامل الممرض نفسه.
• قبل الدراسة ، يجب أن يكون المرض المشتبه به معروفًا بدقة ، لأن الاختبار محدد للغاية.
• احتمال وجود مؤشرات خاطئة ناتجة عن مشاكل فنية ، استقبال الأدوية، وجود عدة في وقت واحد الأمراض المزمنةأو اضطرابات التمثيل الغذائي في جسم المريض.
• يجب أن يتم تفسير النتائج فقط من قبل أخصائي مؤهل تأهيلا عاليا ، لأنه من أجل تفسير البيانات التي تم الحصول عليها ، من الضروري الحصول على تدريب خاص ومخزون كبير من المعرفة الطبية في مجال معين.
• ELISA هو تحليل نادر إلى حد ما ، لذلك لا يتم إجراؤه في جميع مختبرات التشخيص.
• هذه الطريقة مكلفة للغاية ، لأنه بالإضافة إلى الكواشف ، يجب أن يحتوي المختبر على العديد من المعدات وعينات من المستضدات باهظة الثمن التي يتم إنتاجها في المعاهد الخاصة.

متى يتم استخدام الإنزيم المناعي؟

القائمة الكاملة للإشارات لتعيين المقايسة المناعية الإنزيمية واسعة جدًا ، فهي تشمل جميع فروع الطب تقريبًا.

في أغلب الأحيان ، يتم استخدام ELISA لهذه الأغراض:

• الكشف عن الأمراض المعدية.
• تشخيص الأمراض التناسلية.
• تعريف حالة المناعةأو بعض أمراض المناعة الذاتية ؛
• تحديد علامات الورم.
• تعريف الهرمونات.

في حالة العدوى و أمراض فيروسيةتسمح هذه التقنية بتحديد الأمراض التالية:

بالإضافة إلى ذلك ، تسمح لك ELISA بتحديد النوبة القلبية بسرعة وفعالية ، وتقييم القدرة الإنجابية للجسم ، وتحديد الحساسية ، ومصدرها ، وما إلى ذلك.

تستخدم تقنية ELISA للبحث السريري في تطوير منتجات جديدة الأدويةوفي تقييم تأثيرها على جسم الإنسان.

أنواع العينات وطرق اختيارها للبحث

في أغلب الأحيان ، تكون مادة اختبار المقايسة المناعية للإنزيم هي الدم ، الذي يؤخذ من الوريد المرفقي للمريض. يتم أخذ العينات على معدة فارغة ، خاصة في الصباح. بعد الانتقاء من الدم ، يتم فصل الخلايا المتشكلة التي تتداخل مع الدراسة وإزالتها ، تاركةً فقط المصل.

عند تشخيص التهابات الجهاز البولي التناسلي ، غالبًا ما تصبح المسحات من الأنسجة المخاطية للأعضاء التناسلية ، والمخاط من مجرى البول أو عنق الرحم ، وعينات من المستقيم ، وكشط من تآكل أو تقرحات في منطقة الفخذ ومن أجزاء أخرى من الجسم. يمكن أخذ مسحات من تجويف الفم وكذلك من البلعوم الأنفي.

في بعض الأحيان يتم استخدام المقايسة المناعية الإنزيمية في ممارسة التوليد وأمراض النساء أثناء الحمل لتحديد حالة السائل الأمنيوسي. في هذه الحالة ، يصبح السائل الأمنيوسي هو العينة. للقيام بذلك ، يتم أخذ كمية صغيرة من السائل عن طريق ثقب المثانة الجنينية بإبرة طويلة. تتم جميع عمليات التلاعب بأداة معقمة لتقليل المخاطر المحتملة.

غالبًا ما تصبح المادة سائلاً دماغيًا أو سائلًا مصليًا. يحدث هذا بالتخدير الموضعي الذي يتم حقنه.

حدد نوع المواد اللازمة للمقايسة المناعية للإنزيم ، يجب على الاختصاصي الذي يرسل إلى الدراسة. غالبًا ما يتم أخذ عينات من عدة أنواع دفعة واحدة أو من أماكن مختلفة. يجب على الطبيب الذي أصدر الإحالة لهذا النوع من الفحص أن يخبر المريض أيضًا عن التحضير لتسليم المادة الحيوية.

التحضير للمقايسة المناعية للإنزيم

لزيادة دقة البيانات التي تم الحصول عليها بعد المقايسة المناعية للإنزيم ، يجب أن يكون التحضير لاختيار المادة على النحو التالي:

• قبل 10 أيام من الدراسة ، استبعد المضادات الحيوية والأدوية المضادة للفيروسات ومضادات الفطريات ؛
• ليوم واحد من الضروري استبعاد الكحول والتدخين وتعاطي المخدرات ؛
• خلال نفس الفترة ، من الضروري تجنب الإجهاد البدني ؛
• إبلاغ الواصف بجميع الأدوية التي يتناولها المريض ؛
• أخبر طبيبك إذا كنت حاملاً أو يشتبه في أنك حامل.

من الأفضل اختيار مواد الاختبار في الصباح على معدة فارغة.

إذا كان التشخيص يهدف إلى تحديد حالة الخلفية الهرمونية ، فمن المهم ضمان حالة الهدوء عشية اليوم وتجنب التوتر العصبي. بالنسبة للنساء ، يتم تحديد التبرع بالدم للهرمونات بشكل واضح حسب الدورة الشهرية الدورة الشهريةوالتي سيبلغها الطبيب وقت التعيين.

قبل 2-3 أيام من أخذ المادة ، يجب استبعاد الأطعمة المقلية والدهنية من القائمة ، ويجب عدم تناول الفواكه الحمضية وأي فواكه وخضروات برتقالية أو صفراء أخرى قبل اختبار التهاب الكبد.

فك رموز نتائج المقايسة المناعية الإنزيمية

تتم الإشارة إلى نتيجة الدراسة النوعية ، كقاعدة عامة ، بعلامات "+" (وجدت) أو "-" (غير موجود).

من خلال وجود أو عدم وجود مجموعات معينة من الغلوبولين المناعي ، يمكن استخلاص الاستنتاجات التالية:

• JgM (-) ، JgG (-) ، JgA (-) - المناعة ضد المرض غائبة تمامًا (لم يواجه الجسم هذا النوع من المستضد من قبل) ؛
• JgM (-) ، JgG (+) ، JgA (-) - سابقًا كان هناك تصادم مع هذا المستضد أو اللقاح ؛
• JgM (+) ، JgG (- / +) ، JgA (- / +) - عملية مرضية حادة (على الأرجح أولية) ؛
• JgM (-) ، JgG (+/-) ، JgA (+/-) - مسار مزمن ؛
• JgM (+) ، JgG (+) ، JgA (+) - الانتكاس ؛
• JgM (-) - مرحلة الشفاء.

تحمل القيم الكمية عبئًا كبيرًا من المعلومات ، ولكن الطبيب المعالج هو الوحيد القادر على تفسيرها ، بناءً على المؤشرات السابقة ، وعمر المريض ، والمعايير الخاصة بكل مرض محدد. لهذا السبب ، من المستحيل تقييم النتائج بنفسك.

كم من الوقت لانتظار النتائج

هذه التقنية لها العديد من الأصناف ، اعتمادًا على المصطلح الذي يتم تحديده للحصول على البيانات المتوفرة. متوسط ​​مدةتشخيص ELISA هو 4-6 ساعات ، مما يسمح لك بإعطاء النتائج في اليوم التالي.

تستغرق الطرق الأطول مدة تصل إلى 10 أيام ، على سبيل المثال ، في حالة اكتشاف الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية.

في حالة الحاجة الملحة ، من الممكن استخدام الطرق السريعة ، والتي يتم فيها الحصول على الإجابة في غضون ساعة إلى ساعتين.

أين يمكنني الحصول على اختبار ELISA؟

نظرًا لأن المعدات الخاصة بهذا النوع من التشخيص باهظة الثمن ، فلا يمكن لجميع المختبرات شرائها. بالإضافة إلى ذلك ، الاختبارات التي تحتوي على مستضدات محددة لها مدة صلاحية محدودة (عادة حوالي عام واحد) ، لذلك يجب تحديثها باستمرار.

لهذه الأسباب ، لا تمتلك المؤسسات الطبية الحكومية دائمًا مختبرات ELISA. في أغلب الأحيان ، تحتاج إلى الاتصال بمراكز طبية خاصة كبيرة أو مراكز تشخيص كبيرة.

لإجراء دراسة ELISA ، يجب أن يكون للمختبر ترخيص خاص ، ويجب أن يخضع الموظفون ومساعدو المختبر لتدريب خاص.

في أغلب الأحيان ، ينصح الطبيب الذي يوجه المريض للفحص بمركز تشخيص أو مختبر محدد.

تكلفة المقايسة المناعية الإنزيمية

يعتمد سعر هذه الدراسة على منطقة البلد وعلى مستوى العيادة التي تقدم الخدمة. في موسكو ، يبدأ السعر الأدنى لتحديد مستضد واحد من 700 روبل. إذا كان من الضروري تحديد عدة جلوبولين مناعي في وقت واحد ، فسيتم تلخيص السعر.

في حالة إجراء تحليل عاجل ، تزداد التكلفة بمقدار 150-200 روبل. لكل مستضد.

على الرغم من التكلفة المرتفعة إلى حد ما ، فإن المقايسة المناعية للإنزيم تجعل من الممكن جعل فحص المريض مفيدًا وسريعًا قدر الإمكان ، مما يقلل الوقت قبل بدء العلاج ويسمح لك باستقرار حالة الشخص بسرعة.

هذا الفيديو يعرض فيلم "أساسيات المقايسة المناعية الإنزيمية".

تشمل قائمة التدابير التشخيصية القياسية المستخدمة للأمراض المعدية المقايسة المناعية الإنزيمية. إذا كانت ELISA لمرض الزهري إيجابية ، فلا داعي للذعر على الفور.

دعونا نفكر بمزيد من التفصيل في ميزات تقنية البحث هذه ومبادئ فك رموز النتائج التي تم الحصول عليها في فئات مختلفة من المرضى.

إن المقايسة المناعية للإنزيم هي إحدى الطرق الأكثر شيوعًا لتشخيص الأمراض المعدية. إنه ينتمي إلى فئة اختبارات اللولب ، أي أنه يمكن استخدامه لإثبات وجود العامل المسبب لمرض الزهري في جسم المريض - الوذمة اللولبية الشاحبة.

بواسطة ELISA ، يتم الكشف عن مرض الزهري بسبب الكشف عن الأجسام المضادة للالتهاب اللولبي. يتم احتواؤها في دم المريض ، ويعتمد نوعها وكميتها على مرحلة المرض وشكله ، مما يتيح لك الحصول على معلومات مهمة حول الحالة الحالية لصحة الإنسان.

المميزات والعيوب

غالبًا ما يتم وصف ELISA لمرض الزهري المشتبه به أو الأمراض المعدية الأخرى. هذا يرجع إلى حقيقة أن التحليل يسمح لك بتحديد نوع ومرحلة المرض بدقة ، وتظل موثوقيته عند مستوى عالٍ - احتمال الخطأ بناءً على نتائج دراسات متعددة هو 1 ٪ فقط ، ELISA الأساسي تبلغ دقته حوالي 90٪.

يتيح لنا استخدام الكواشف عالية الجودة والمعدات الحديثة زيادة دقة المؤشرات.

بشكل عام ، مزايا الطريقة هي:

1. دقة عالية للنتيجة. احتمال تلقي بيانات خاطئة ضئيل للغاية.
2. التقليل من عامل التأثير البشري.المعدات الحديثة لإجراء ELISA تستبعد التأثير البشري على نتائج الدراسة بسبب أتمتة العملية.
3. الكشف عن الأجسام المضادة المحددة. من المستحيل الخلط بين مستضدات من نوع ما مع مستضدات أخرى ، لذلك يظهر التحليل نتيجة دقيقة لتشخيص محدد.
4. إصلاح أدنى انحرافات عن القاعدة. حتى أصغر تركيز للعوامل المرضية لن يمر مرور الكرام.

لا تنسى نقاط الضعف في هذه الطريقة. ELISA لها العيوب التالية:

1. غالي السعر. تعود التكلفة العالية إلى العديد من العوامل ، على وجه الخصوص ، الحاجة إلى معدات جيدة وكواشف عالية الجودة ومتخصصين بمستوى كافٍ من التدريب.
2. الحاجة إلى تشخيص أولي. تحتاج إلى معرفة المستضدات التي يجب البحث عنها ، لأنه بدون بيانات إضافية سيكون من المستحيل إجراء تشخيص دقيق.
3. احتمال وجود نتيجة إيجابية خاطئة. يمكن لبعض حالات الجسم وعوامل أخرى تشويه البيانات النهائية.

مؤشرات لتنفيذ

قد يصف الطبيب مقايسة مناعية إنزيمية ليس فقط لتشخيص مرض الزهري ، ولكن أيضًا لتشخيص عدد من الأمراض المعدية الأخرى.

إذا أخذنا في الاعتبار الموقف بشكل مباشر مع الإصابة بالتهاب اللولبية ، فقد يكون سبب الفحص:

• ظهور الأعراض الخارجية للمرض (القروح ، الطفح الجلدي الزهري ، الصمغ ، إلخ) ؛
• انخفاض كبير في المناعة.
• تحديد أو الاشتباه في مرض الزهري في الشريك الجنسي والأقارب وأفراد الأسرة ؛
• رد فعل إيجابي أثناء الاختبارات الأخرى ؛
• تحديد الأمراض الأخرى التي قد تترافق مع مرض الزهري ؛
• رغبة الشخص الشخصية في الفحص.

طرق التنفيذ

يمكن إجراء ELISA بطرق مختلفة. في كل حالة ، يتم تحديد الخيار الأنسب.

بادئ ذي بدء ، هناك تقسيم للطرق إلى:

1. نوعي. الكشف عن وجود عدوى أو فيروس في جسم المريض.
2. كمي. يحدد تركيز الأجسام المضادة لعامل ممرض في جسم الإنسان ، مما يشير إلى مرحلة وشدة تطور المرض.

يوجد أيضًا تصنيف لطرق إجراء ELISA وفقًا لمبدأ إعادة إنتاج التفاعل الضروري.

هناك 3 خيارات:

1. مستقيم. يتم حقن الأجسام المضادة الموصوفة في عينات الدم المقدمة.
2. غير مباشر مع المستضدات.يتم وضع المستضدات الممتزّة بشكل مبدئي في خلايا صفيحة بوليسترين مخصصة لـ ELISA. ثم تضاف إليها الأجسام المضادة للفيروسات ، مما يؤدي إلى تكوين مجمعات مناعية ضرورية لمزيد من التقييم للنتائج.
3. غير مباشر مع الأجسام المضادة.غالبًا ما تستخدم هذه الطريقة للأمراض التي تنتقل عن طريق الاتصال الجنسي. يتضمن الامتصاص الأولي للأجسام المضادة ، وعندها فقط تضاف المستضدات إلى اللوحة.

قواعد أخذ العينات المادية

لتقليل مخاطر الحصول على نتائج خاطئة ، من الضروري التبرع بالدم لتحليلها بشكل صحيح.

قبل الخضوع لاختبار ELISA ، يجب مراعاة بعض القيود:

• تجنب الإجهاد البدني والعاطفي الشديد ؛
• الإقلاع عن التدخين وشرب الكحول قبل يوم إلى ثلاثة أيام على الأقل ؛
• لبضعة أيام تحتاج إلى التحول إلى التغذية السليمة ؛
• من المستحسن أن تتحكم النساء في مرحلة الدورة الشهرية ، لأن الهرمونات يمكن أن تشوه النتائج ؛
• يجب أن تكون الوجبة الأخيرة قبل 8-10 ساعات من التبرع بالدم ؛
• لمدة 10 أيام ، يتم استبعاد الأدوية التي قد تؤثر على نتائج الدراسة.

بالنسبة إلى ELISA ، يتم أخذ الدم الوريدي من الوريد المرفقي ، ويجب أن يؤخذ في الصباح على معدة فارغة. بشكل عام ، تنطبق القواعد القياسية للتحضير لأخذ عينات الدم الوريدي. اعتمادًا على وجود المرض الذي يتم اختباره ، قد يتم تقديم متطلبات إضافية للتحضير الأولي للمريض.

المنهجية

تعليمات إجراء ELISA بسيطة للغاية:

1. يأخذ المريض الدم من الوريد.
2. يتم تحضير المواد المأخوذة وتقسيمها إلى عينات على لوح شبكي دقيق خاص.
3. يتم خلط المستضدات مع الأجسام المضادة وفقًا للطريقة المختارة.
4. يتم تقييم رد الفعل. تتم مقارنة العينات مع عينات المراقبة ، ويتم إجراء التقييم النوعي والكمي للنتائج.
5. يتم إدخال البيانات في جدول خاص مع تطبيق المؤشرات الكمية (إجمالي الأجسام المضادة).
6. الطبيب المعالج يفك شفرات النتائج. إذا لزم الأمر ، يتم وصف العلاج المناسب.

بعد الفحص ، يتم إعطاء المريض وثيقة بالنتائج. يحتوي على شكل جدول مع التسميات المقابلة لكل نوع من أنواع الغلوبولين المناعي عند التقاطع مع أسماء الأمراض المعدية.

فك التشفير

لن يتمكن سوى المتخصص من فك شفرة نتائج التحليلات بشكل صحيح. من الصعب أن تعرف بنفسك ، على سبيل المثال ، ما تعنيه نتيجة ELISA k = 1 4. يمكن أن يحدث مرض الزهري أيضًا بأشكال مختلفة ، مما يؤثر أيضًا على البيانات النهائية.

تشير النتائج إلى 3 أنواع من الغلوبولين المناعي:

1. IgM. السماح بتحديد فترة الإصابة بمرض الزهري. تشير النتيجة الإيجابية إلى تفاقم المرض. قد يشير غيابهم إلى مغفرة الأمراض المزمنة أو شكل كامن من المرض.
2. إيغا.يشير إلى مرض مضى عليه أكثر من شهر منذ الإصابة. إنها أيضًا علامة مرحلة حادةالأمراض ، سواء مع الأمراض العادية والأمراض المزمنة المهملة.
3. مفتش. إنها علامة على فترة الذروة للمرض ، أي تفاقمه. مع مرض الزهري ، يظهر رد فعل إيجابي بعد العلاج ببعض الوقت. في بعض أنواع الأمراض ، يمكن أن يكون علامة على تطور المناعة.

ينتج الجسم هذه المواد في تسلسل معين ، وهي علامة إضافية على المرض. من خلال الاختبارات النوعية ، يتم إثبات وجود الغلوبولين المناعي فقط في الدم من كل نوع.

يتم التعبير عن هذا في تغيير لون المواد المشاركة في التحليل. المؤشرات الكمية هي مساعدة ، فهي تصف الموقف بشكل أكثر دقة. تشير نسبة المستضدات والأجسام المضادة إلى شدة المرض وشدة استجابة الجسم.

ماذا أفعل

إذا كان المريض مصابًا بالفعل بمرض الزهري ، يتم دائمًا اكتشاف ELISA إيجابيًا ، فمن المستحيل عدم ملاحظة وجود اللولبيات في مثل هذه الدراسة. لا تيأس ، المرض يستجيب جيداً للعلاج ، خاصة في المراحل الأولية.

ماذا تفعل إذا كانت نتيجة الاختبار إيجابية:

• الخضوع لفحوصات إضافية حسب إرشادات الطبيب ؛
• خذ دورة من العلاج بالمضادات الحيوية وفقًا للمخطط المختار ؛
• التركيز على تقوية جهاز المناعة.
• إبلاغ شريكك الجنسي عن المرض ؛
• في المستقبل ، يجب الخضوع للتشخيص الوقائي بانتظام حتى يتم إلغاء التسجيل في المستوصف (بعد 5 سنوات في حالة عدم وجود نتائج اختبار إيجابية).

لا داعي لتأجيل الإجازة المرضية والخوف من إعلان النتائج. يتم تشفير التشخيص ويبقى سريًا ، فقط في حالة وجود تهديد بالعدوى لأشخاص آخرين ، من الضروري إبلاغ الأقارب والشريك الجنسي بالمشكلة حتى يخضعوا للفحوصات المطلوبة.

النتيجة الإيجابية الكاذبة وأسبابها

في بعض الأحيان يتم تسجيل نتيجة الاختبارات الأخرى وتكون ELISA إيجابية كاذبة لمرض الزهري. هذا هو السبب في أنه يوصى بتنفيذ 2-3 طرق مساعدة وتكرار الإنزيم المناعي بعد فترة.

حالات عدم الدقة هذه نادرة ، فهي ناتجة بشكل أساسي عن هذه العوامل:

• حمل؛
• الأمراض المزمنة؛
• التطعيم الأخير
• إصابة.

تنقسم النتائج الإيجابية الكاذبة إلى حادة ومزمنة ، حسب طبيعة العامل الذي أثارها.

يتم عرض أهمها في الجدول:

في حالة وجود مثل هذه المشاكل الصحية ، قد يظهر اختبار مرض الزهري نتيجة إيجابية ، ولكن هذا فقط نتيجة لإنتاج الجسم للبروتينات لمحاربة المرض. ومع ذلك ، فإن ELISA تتعرف عليها كمستضدات.

قد يعاني الطفل السليم حتى عمر سنة ونصف من نتائج ELISA الإيجابية الخاطئة إذا أصيبت المرأة بمرض الزهري أثناء الحمل. قبل هذا العمر ، ليس للدم الوقت الكافي لتجديد نفسه تمامًا ، لذلك قد تكون الأجسام المضادة للأم موجودة فيه. الاستثناء هو حالة الكشف عن الغلوبولين المناعي IgM.

يمكنك معرفة المزيد عن ميزات الإنزيم المناعي ومنهجيته من خلال مشاهدة الفيديو في هذه المقالة.

اختبار الدم ELISA هو طريقة شائعة للكشف عن الأمراض المختلفة. تكون نتيجة فحص الدم ، التي تم تفسير فك تشفير ELISA من قبل طبيب التشخيص المختبري ، موثوقة في معظم الحالات.

ما هو إليسا

ELISA هي طريقة تشخيصية حديثة تُستخدم لتشخيص العدوى والاضطرابات الهرمونية والمناعة وأمراض الأورام في المختبر. تسمح الطريقة باكتشاف الأجسام المضادة للعدوى بالفعل في المراحل المبكرة من المرض.تنتمي هذه الطريقة إلى طرق التشخيص غير المباشرة ، حيث تكشف عن استجابة الجسم المناعية. من بين مزايا ELISA بالمقارنة مع طرق التشخيص الأخرى ، يمكن للمرء تحديد مستوى عالٍ من قابلية التصنيع ، مما يقلل من احتمال حدوث أخطاء. هذه الطريقة حساسة للغاية وتستخدم لتشخيص الأمراض لدى كل من الأطفال والبالغين. هناك عدد كبير من التعديلات المختلفة لـ ELISA.

تعتمد طريقة ELISA على خصوصية التفاعلات الكيميائية المناعية ، وكذلك الأنماط الفيزيائية والكيميائية لتفاعلات معقدات الأجسام المضادة للمستضد. يتم إنتاج التفاعلات بمشاركة إنزيمات محددة ، وهي عبارة عن ملصقات للكشف عن الأجسام المضادة. نتيجة للتفاعل الكيميائي المناعي ، ترتبط الأجسام المضادة المحددة بدقة بالمستضدات المقابلة. يكاد اختبار الدم عن طريق المقايسة المناعية الإنزيمية يلغي تقريبًا إمكانية الحصول على نتيجة إيجابية خاطئة. يحكم أخصائيو التشخيص المختبري على نتيجة إيجابية أو سلبية بناءً على ما إذا كان المحلول ملطخًا أثناء الإشارة الأنزيمية لمركب الجسم المضاد للمستضد. إذا كان المحلول ملونًا ، فعندئذٍ تفاعل المستضد مع الجسم المضاد ، تكون نتيجة ELISA إيجابية.

ما هي الأمراض التي يمكن الكشف عنها بواسطة ELISA

تسمح دراسة المقايسة المناعية للإنزيم بما يلي:

• التعرف على عدد من الأمراض المعدية ؛
• تشخيص أمراض المناعة الذاتية.
• للكشف عن وجود الأورام.
• تحديد الاضطرابات الهرمونية.
• القيام بأبحاث أخرى.

يسمح لك اختبار الدم بواسطة ELISA بتحديد وجود العدوى التالية:

تُستخدم الطريقة للكشف عن مستضدات مسببات الأمراض لعدد من العدوى ، وكذلك لاكتشاف الأجسام المضادة من الفئات المختلفة. اكتسبت طريقة ELISA شعبية كبيرة للكشف عن مرض الزهري وفيروس نقص المناعة البشرية والتهاب الكبد الفيروسي. لا يوصى بتحديد وجود ومستوى الأجسام المضادة في مصل الدم لغرض التشخيص الأولي للأمراض المنقولة بالاتصال الجنسي. في هذه الحالة ، لا يمكن أن يكون وجود الأجسام المضادة في الدم سوى علامة على أن جسم المريض كان على اتصال بالعامل المعدي في الماضي.

يتم تشخيص أمراض المناعة الذاتية المختلفة بواسطة ELISA من خلال دراسة:

• الأجسام المضادة للنواة
• الأجسام المضادة للحمض النووي مزدوج الشريطة ؛
• الأجسام المضادة للمستضدات النووية القابلة للذوبان (شاشة ENA) ؛
• أضداد الكارديوليبين.
• مفتش إلى الببتيد سيترولين.
• عامل الروماتويد؛
• بروتين سي التفاعلي؛
• الأجسام المضادة الذاتية لمستضدات السيتوبلازم من العدلات (شاشة ANCA).

تعتبر المجمعات المناعية المحددة مميزة لبعض أمراض المناعة الذاتية. على سبيل المثال ، تعتبر الأجسام المضادة للحمض النووي مزدوجة الشريطة مميزة لمرض مثل الذئبة الحمامية الجهازية.

يتم تعريف أمراض الأورام بمقايسة ممتص مناعي مرتبط بالإنزيم لمصل الدم لعلامات الورم المحددة ، مثل PSA ، CA-125.

يشير PSA إلى وجود ورم غدي في البروستاتا وسرطان البروستاتا. CA-125 هو علامة الورم لسرطان المبيض. تزداد القيمة أيضًا مع الأورام السرطانية في الرحم والغدد الثديية وبطانة الرحم.

التحضير للتحليل

لضمان أقصى دقة للنتائج ، تحتاج إلى اتباع قواعد معينة للتحضير للدراسة. يتم أخذ تحليل التشخيص المختبري بواسطة ELISA ، كقاعدة عامة ، في الصباح من الوريد المرفقي. من الضروري التبرع بالدم على معدة فارغة. بالإضافة إلى هذه الوصفة البسيطة ، يجب اتباع التوصيات التالية للتحضير:

• قبل 24 ساعة من الدراسة ، من الضروري استبعاد الكحول والتدخين ؛
• تجنب المجهود البدني الثقيل ؛
• ابق هادئا؛
• تجنب التوتر العصبي
• التبرع بالدم من أجل ELISA في موعد لا يتجاوز 10 أيام بعد سحب الدواء ؛
• أخبر طبيبك إذا كنت تتناول أي أدوية تحتاجها.

بالإضافة إلى ذلك ، قبل أيام قليلة من الاختبار ، يوصى باتباع نظام غذائي. في الوقت نفسه ، استبعاد الأطعمة الدهنية والأطعمة المقلية من النظام الغذائي. قبل اختبار التهاب الكبد الفيروسي ، استبعد من النظام الغذائي ليس فقط الأطعمة الدهنية والمقلية ، ولكن أيضًا الفواكه الحمضية ، وكذلك الخضار البرتقالية.

وتجدر الإشارة إلى أن نتائج مجموعة معينة من الدراسات الهرمونية تتأثر بعامل مثل مرحلة الدورة الشهرية. يجب مناقشة الحاجة إلى إجراء تحليل في مرحلة أو أخرى من الدورة الشهرية مسبقًا مع طبيبك. خلاف ذلك ، قد تحصل على نتائج غير متوقعة. على سبيل المثال ، يختلف المستوى الطبيعي للهرمون الجنسي اللوتيني عند النساء تبعًا ليوم الدورة:

• 1-12 يومًا - 2-14 ملي / لتر ؛
• 12-14 يومًا - 24-150 ملي / لتر ؛
• من 15 يومًا قبل بدء دورة جديدة - 2-17 ملي / لتر.

تفسير نتائج ELISA

يسمح لك التحليل بإثبات وجود أجسام مضادة من فئات مختلفة في الجسم. هناك ثلاث فئات من الأجسام المضادة:

يحدث إنتاج هذه الأجسام المضادة في مراحل مختلفة من المرض. الأجسام المضادة IgM هي أول الأجسام التي يتم إنتاجها في الجسم بعد الإصابة. وجودهم هو مؤشر على المرض في أي حال. في الكائن الحي الشخص السليمهذه الفئة من الأجسام المضادة غائبة.

تتواجد هذه الجلوبولينات المناعية في مصل الدم لمدة 5-6 أسابيع.

تشير الغلوبولين المناعي من الفئة G الموجودة في الدم إلى أن الشخص إما مصاب بالفعل بالمرض أو أنه حامل للعدوى. يبدأ إنتاج هذه الأجسام المضادة بعد الأجسام المضادة من الفئة M ، في معظم الأمراض ، بعد 3-4 أسابيع من الإصابة. وجودهم في الجسم ممكن لعدة سنوات. وفي بعض الأمراض (على سبيل المثال ، مرض الزهري) ، يوجد IgG في الدم مدى الحياة.

إذا كان IgA موجودًا في الجسم ، فمن الضروري محاربة العدوى بأكبر قدر ممكن. تظهر الأجسام المضادة من هذه الفئة فقط في حالة الإصابة المزمنة الأمراض المعدية. يشير اختفاء IgA إلى تدمير العدوى.

إذا تم إجراء تحليل ELISA بتنسيق مرحلة الطفولةما يصل إلى 1.5 سنة ، يجب أن تؤخذ في الاعتبار الميزة التالية: يحتوي دم الطفل على الـ IgG الخاص بالأم لمختلف أنواع العدوى. هذا لا يعني أن الطفل مريض. في هذه الحالة ، هو بالأحرى القاعدة. إن وجود IgM دليل على وجود عدوى داخل الرحم أو عدوى مكتسبة بعد الولادة. لا تستطيع الأم IgM عبور المشيمة إلى جسم الطفل.

يوضح الجدول التوليفات المحتملة لوجود أو عدم وجود أجسام مضادة من 3 فئات في الجسم وتفسيرها.

عند فك رموز التحليلات ، تشير (+) إلى نتيجة إيجابية ، و (-) تشير إلى العكس ، أي سلبية. النتيجة ، التي تظهر وجود أو عدم وجود أي مادة في الجسم ، تسمى النوعية. يمكن استكماله بالكمية. تعرض النتيجة الكمية المحتوى الكمي للمواد المختلفة في الجسم.

وتجدر الإشارة إلى أن أنظمة الاختبار لها قيم مرجعية خاصة بها ، تحددها الشركة المصنعة ، والتي تميز المؤشرات. تجاوز القيم المرجعية ، كقاعدة عامة ، يعني وجود أمراض معينة في جسم الموضوع.

بعد تلقي نتائج ELISA ، يجب على الطبيب المعالج فك القيم التي تم الحصول عليها. فقط يمكنه إجراء تقييم صحيح للنتائج وتحديد مرحلة المرض.

في تواصل مع